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          血清學檢測在豬傳染病防控中的應用

          [ 更新時間:2013-08-16 ]

           

          血清學檢測在豬傳染病防控中的應用
           
          血清學檢測就是根據豬群規模,在特定的時期對各階段豬群按比例采集血清樣品,在實驗室利用標準化檢測試劑盒,檢測樣品的血清抗體滴度,并采用科學的方法分析豬群疫病的流行規律以及動態學過程,評價豬群免疫狀態,為豬場管理者提供數字化的信息,科學防控豬傳染病。
          1 血清學檢測的目的
          1.1 引進新豬群
          在引進新豬群之前,進行群體血清學檢測,避免引入陽性帶毒個體。
          1.2 預測免疫接種時間
          在豬病防控中,恰當的免疫接種時間往往是有效免疫的關鍵,使用疫苗尤其是活苗的時候,一定要考慮母源抗體的影響,最可靠和可行的方法就是通過血清學方法來測
          定母源抗體的消長,確定免疫接種的最佳時機。首次免疫接種時抗體的轉陽率與ELISA抗體的阻斷率呈明顯的負相關,即免疫前抗體水平越高(體現為阻斷率的上升),免疫效果越差。當母源抗體的阻斷率高于70%時,免疫很難奏效。
          1.3 疫苗效果的評價
          疫苗生產廠家繁多,質量參差不齊,疫苗的運輸、管理、保存、注射等諸多環節都會影響疫苗的效力,通過血清學檢測可以了解免疫注射后豬群體內是否產生保持抵抗
          豬病強毒攻擊的有效抗體,從而科學合理地做好免疫。
          1.4 分析疫病發生的動態
          通過定期的分階段、分群體血清學檢測能掌握疫病的發展動態,比如可以了解在種豬群中藍耳病是否處于“穩定狀態”、是否存在先天性感染和早期感染、生長育肥文章編號:1004—5090(2013)02—0024—02豬在什么時間感染藍耳病、藍耳病是否和喘氣病同時發
          生,從而在敏感時期采取特定的干預措施,以避免或降低疫病造成的損失。
          1.5 疫病的診斷
          雖然血清學檢測能成功地用于免疫評估,但也有一些直接檢測抗原或能夠區分野毒和免疫抗體的方法,如herdchek豬瘟抗原ELISA試劑盒、CHEKIT豬瘟抗原試劑盒等能夠直接檢測到豬瘟病毒的抗原成分,豬偽狂犬病病毒gI抗體試劑盒、CHEKIT口蹄疫3ABC抗體試劑盒等能夠將免疫抗體和野毒抗體很好區分。另外,雖然有一些方法既可以檢測到免疫抗體和感染抗體,但由于多數情況下野毒抗體與免疫抗體往往在滴度或特性上存在區別差別,
          所以也可以提示養殖者是否存在野毒感染,如在使用Herdchek豬瘟抗體試劑盒來檢測血清抗體時,研究者發現,將阻斷率在70%以上的血清進一步稀釋到40倍,免疫血清大多會呈現陰性結果,而多數人工感染豬只的血清則仍然呈現陽性結果。
          1.6 考察豬群的動態學變化
          豬場的生產總是存在波動,如果豬場有生產正常時的血清學檢測資料,再將生產異常時的資料與常規資料檔案進行對比,很容易查到出現問題的原因。另外如果在豬群發病時分別采取發病期和恢復期的血清,通過分析抗體滴度的變化,也有利于進行疫病的診斷與分析。
          1.7 疫病的凈化
          血清學檢測用于疫病凈化的經典案例是偽狂犬病。由于gE基因缺失疫苗的應用使得我們可以通過血清學方法區分疫苗注射動物和野毒感染動物,通過與gE基因缺失疫苗配套的gE—ELISA試劑盒的檢測與分析,科學指導豬場偽狂犬病的凈化過程,歐盟許多國家以及美國偽狂犬病的凈化已經取得成功,在中國同樣有許多豬場也獲得成功。另外口蹄疫也可以通過非結構蛋白ELISA方法區分野毒感染動物和疫苗注射動物,這極大方便了豬場的診斷和流行病學分析。
          2 血清學檢測采樣與送檢方法
          2.1 采樣分組
          通常采樣應包括種豬群和生長豬群。種豬群應包括公豬、不同胎次的經產母豬以及已經選育的后備豬。生長豬根據周齡不同可分為6~7組,每組間隔3~4 W,根據檢測疫病的種類不同應有所調整,比如對于藍耳病、偽狂犬病、豬瘟等可分別采集4、7、10、13、l6、20、24周齡生長豬的血清樣品。
          2.2 采樣數量
          采樣數量與豬群的規模大小相關,通常是以基礎生產母豬的數量來確定。一般按基礎生產母豬數量的10% ~15%抽樣,進行血清學檢測。
          2.3 器材
          為便于血清學檢測,應準備一些基本的器材,比如低速離心機、一次性注射器、記號筆、無菌試管、1.5 ml離心管、泡沫箱、冰袋等。
          2.4 采樣方法
          豬血清樣品的采集通常選用頸靜脈、前腔靜脈,也可選耳靜脈。用一次性注射器無菌采血3 ml~5ml,置無菌試管中擺成斜面,室溫下靜置2~4 h(防止陽光曝曬),待血清充
          分析出后,或離心分離血清,用無菌注射器吸出血清,注入滅菌離心管中,蓋緊離心管蓋,通常情況下進行常規的檢測每份血清樣品總量應不少于1 ml。
          2.5 樣品的記錄應盡量詳細
          送往實驗室的樣品應有一式二份的送檢報告,一份隨樣品送實驗室,另一份留存備案。樣品記錄應包括以下內容:豬場的名稱地址;飼養品種及其數量;飼養方式、是否自繁自養、斷奶日齡、各個豬群的免疫程序和免疫日期、所用疫苗的種類以及是否發病及用藥情況等。
          2.6 血清樣品的運送
          血清樣品必須在24 h內放在4℃左右的容器中送到實驗室,24 h內不能送到實驗室的,需要在運送過程中保持樣品溫度處于一20"C以下,這樣才能保證檢測結果的準確。
           
           
          本文內容摘自《河南畜牧獸醫 2013年(第34卷)第2期》
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